Антитела "+", РНК "-" - советы врачей на каждый день

Ученые всего мира пытаются найти эффективное лекарство от коронавируса. Инфекция очень быстро распространяется по всей планете и приводит к опасным последствиям, вплоть до смертельных исходов. Однако на данный момент препаратов, которые можно использовать для лечения пациентов с COVID-19, не существует.

В чем опасность коронавируса?

Коронавирусная инфекция относится к целому семейству вирусов, способных вызывать респираторные заболевания. COVID-19 – последний из открытых вирусов данной группы. Впервые о нем стало известно в декабре 2019 года, когда первые случаи заражения были выявлены в Китае. За очень короткое время пандемия охватила весь мир.

Новый вирус поражает дыхательные пути. Иногда организму удается победить болезнь за счет выработки антител иммунной системой.

Но у людей пожилого возраста, с хроническими заболеваниями и патологиями развивается тяжелая форма коронавирусной пневмонии. Из-за поражения легких возникают сложности с дыханием, причем вирус очень активно распространяется в организме.

В итоге прекращается поступление кислорода в кровь и го доставка к внутренним органам, а это грозит летальным исходом.

Риск заражения коронавирусом очень высок сразу по двум причинам. Первая – высокая способность инфекционного агента проникать в человеческий организм. Вирус распространяется в основном воздушно-капельным путем, но возможно заражение и через поверхности, на которых он сохраняется достаточно долго.

Вторая причина – отсутствие симптомов заболевания. Очень часто люди, зараженные COVID-19, даже не подозревают об этом, поскольку у них нет никаких признаков болезни. Между тем они уже являются переносчиками инфекции и могут заражать окружающих.

Почему антибиотики не помогают от COVID-19?

Поскольку нагрузка на медицинские учреждения многократно возросла, во многих государствах принято решение госпитализировать исключительно больных с тяжелой симптоматикой и угрозой жизни. Люди, у которых выявлено заражение коронавирусом, но нет опасных симптомов, должны оставаться на самоизоляции как минимум 14 дней – именно столько длится инкубационный период.

Неудивительно, что в таких обстоятельствах многие заинтересовались вопросом, чем лечиться от коронавируса в домашних условиях. И первое, что приходит в голову – это антибиотики, ведь именно их назначают врачи для борьбы с пневмонией.

Действительно, COVID-19 вызывает пневмонию, однако антибиотики при коронавирусе не помогают. Это противомикробные препараты, которые способны подавлять грибки и бактерии. Вирусы к патогенным микроорганизм не относятся, поэтому антимикробная терапия против них бессильна.

Правда, в некоторых ситуациях такие лекарства все же назначаются, но не для борьбы с вирусом. Препараты нужны для лечения вторичных инфекций бактериального происхождения, которые развиваются в виде осложнений. Какие антибиотики принимать при коронавирусе в этих целях, может решить только врач.

Но попытки убить вирус при помощи антибактериальных лекарственных средств могут оказаться не просто бесполезными. Медики указывают на опасность антибиотиков при коронавирусной инфекции. Прием таких лекарств для профилактики или лечения заболевания только усугубляет ситуацию.

В чем опасность антибиотиков?

Антибиотиками называются вещества, способные блокировать размножение бактерий и убивать их. На данный момент известны тысячи таких веществ, среди них есть натуральные и синтетические. Все они разделены на 16 классов.

Различают 2 вида антибиотиков: первые вызывают гибель бактерий, вторые останавливают процесс их размножения. Происходит это за счет разрушения клеточных стенок микроорганизмов или ограничения питания клеток.

Принимать антибиотики в любой ситуации следует исключительно по назначению врача. Дело в том, что каждое такое вещество эффективно в отношении определенных бактерий, а не всех патогенных микроорганизмов. Подобрать адекватное лечение в конкретном случае может только квалифицированный доктор, а бесконтрольный прием таких препаратов только усугубляет положение.

Всемирная организация здравоохранения и врачи из разных стран мира не раз заявляли об опасности приема антибиотиков при коронавирусе. Эти препараты убивают не только вредные, но и полезные бактерии. Это существенно увеличивает риск инфекционного заражения, в том числе коронавирусного.

Толстый кишечник человека заселен огромным количеством микробов, которые крайне важны для иммунных процессов. Прием антибиотиков никак не влияет на вирусы и не мешает им размножаться, зато убивает полезные бактерии и ослабляют защиту организма.

Лекарства от коронавируса: есть ли надежда?

На сегодняшний день нет ни одного препарата для лечения коронавируса с доказанной эффективностью. Ученые и медики продолжают клинические испытания различных лекарств:

Антивирусных препаратов, ограничивающих способность вируса к размножению;
Средств для стабилизации иммунной системы – при поражении коронавирусом иммунитет часто дает слишком активную реакцию. Которая негативно влияет на весь организм;
Антител, созданных в лабораторных условиях и взятых у людей, организм которых успешно справился с заражением данным вирусом.

Ранее была опубликована информация об эффективности лекарства от вируса Эболы против коронавирусной инфекции. Однако впоследствии выяснилось, что препарат не улучшает состояние пациентов с COVID-19 и не убивает вирус.

Предполагалось, что победить коронавирус помогут лекарства от ВИЧ. В лабораторных условиях они действительно продемонстрировали определенную эффективность. Однако эти лекарственные средства не помогли сократить уровень вируса у пациентов с тяжелой формой заболевания и не снизили смертность.

Определенные надежды были связаны с лекарством от малярии. Об их эффективности уже заявил Дональд Трамп, однако научных подтверждений этому пока недостаточно, хотя некоторые врачи подтверждают способность препарата бороться с коронавирусной инфекцией.

Во многих странах сейчас используется метод переливания плазмы крови. Его суть заключается в том, что в крови переболевшего человека должны сформироваться антитела к вирусу. Они содержатся в плазме крови, которую и переливают пациентам с коронавирусом.

Когда появится вакцина от COVID-19?

Одновременно идет работа по созданию новой вакцины для профилактики заражения COVID-19. Пока невозможно сказать, как долго продлится этот процесс. У многих ученых даже нет уверенности в том, что создание такого средства в принципе возможно.

Тем не менее, представители американской биотехнологической корпорации Moderna сообщили об успешном завершении первой фазы испытаний такой вакцины. Препарат содержит РНК белка SARS-CoV-2, который относится к группе коронавирусов.

При введении в человеческий организм вырабатывается безвредный белок, в ответ на который возникает необходимый иммунный ответ. Сообщается, что вакцина хорошо переносится и не вызывает побочных эффектов.

Тем временем в Китае ведутся испытания сразу пяти вакцин.

Еще одна американская биотехнологическая компания Regeneron Pharmaceuticals выбрала иной путь. Он заключается в искусственном добавлении антител в организм.

Предполагается, что это будет способствовать эффективной борьбе с вирусом. Специалисты отобрали лучшее по всем показателям антитело, а затем клонировали его.

Клинические испытания препарата должны начаться в июне, производство антител уж запущено, изготовлена опытная партия.

Как противостоять коронавирусу?

Назвать точные сроки появления лекарства или вакцины от коронавируса пока невозможно.

На данном этапе важно соблюдать меры предосторожности: мыть руки с мылом, пользоваться спиртовыми дезинфицирующими растворами, избегать посещения людных мест и контакта с больными людьми.

При появлении первых признаков заболевания необходимо обращаться за медицинской помощью, а не заниматься лечением, в том числе с помощью антибиотиков.

Тесты на антитела к COVID-19 в Центре новых медицинских технологий Новосибирск

За время COVID-19 лаборатория ЦНМТ усилила свои позиции по диагностике коронавирусной инфекции. Лаборатория ЦНМТ работает в статусе референсного центра. Результаты наших тестов на COVID-19 не нуждаются в подтверждении Роспотребнадзора.⠀

Тестируем без выходных;
Справки выдаются на двух языках. ⠀

В ЦНМТ работает два заборных пункта с отдельным входом, где вы можете сдать анализ на COVID-19:

ул. Титова,7 (левый берег);
ул. Пирогова, 25/4 (Академгородок).

Мы расширили расписание, чтобы вы могли записаться на тестирование COVID-19 в режиме “день в день”.

Для снижения количества контактов мы предлагаем вам воспользоваться удобными сервисами на сайте cnmt.ru:

онлайн-запись;
онлайн-оплата.⠀⠀

Помимо анализа ПЦР, вы можете сдать анализы на антитела к Covid-19. Сочетание двух методов — определение наличия вирусной РНК и антител в крови — наиболее информативно для диагностики коронавирусной инфекции и определения стадии заболевания.

Если ПЦР-тест на COVID-19 определяет, заразны вы на момент сдачи анализа или нет, то тест на ранние (IgМ) и поздние (IgG) антитела позволяет выявить наличие иммунитета на любой его стадии и отвечает на вопросы:⠀

болели ли вы COVID-19 ранее (в том числе бессимптомно) или болеете сейчас;
какой уровень иммунитета к COVID-19;⠀
являетесь ли вы носителем вируса;⠀
вакцинироваться или нет;
есть ли иммунный ответ после вакцинации.

Какие виды антител к коронавирусу определяются в наших лабораториях? В лаборатории ЦНМТ определяют три вида антител:

выявляются на 2 сутки после заражения COVID-19 (в т.ч. бессимптомного);⠀
чувствительнее чем ПЦР мазок;⠀
для ранней диагностики коронавирусной инфекции.

Метод определения: Твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), полуколичественный тест, «SARS-CoV-2-IgA-ИФА-БЕСТ» производства АО Вектор-Бест.

выявляются примерно на седьмые сутки после заражения COVID-19 (в т.ч. бессимптомного);⠀
достигают пика через неделю;⠀
сохраняются в организме около двух месяцев.

Метод определения: Твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), полуколичественный тест, «SARS-CoV-2-IgM-ИФА-БЕСТ» производства АО Вектор-Бест.

Поздние Антитела к спайковому (S) белку SARS-CoV-2 (IgG): появляются на второй-третьей̆ неделе после заболевания COVID-19 (в т.ч. и бессимптомного);⠀

сохраняются в организме от трех месяцев до нескольких лет;
также являются информативными после вакцинации против коронавируса.

Метод определения: Твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), полуколичественный тест, «SARS-COV-2-IgG-ИФА-БЕСТ» производства АО Вектор-Бест.

Антитела (IgG), определяемые в лабораториях ЦНМТ информативны и при заболевании COVID-19, и после вакцинации против коронавируса.

Тест на антитела перед вакцинацией от COVID-19

Перед вакцинацией рекомендуем сдать тест на наличие как ранних (IgM), так и поздних антител(IgG).

Наличие ранних антител (IgM) говорит о том, что человек является носителем вируса COVID-19.⠀Вакцинирование при этом крайне нежелательно, ведь большинство осложнений COVID-19 связаны с чрезмерной активностью иммунной системы.

Наличие поздних антител (IgG) говорит о перенесенной инфекции COVID-19 и наличии иммунитета. Необходимо регулярно контролировать уровень этих антител в организме, чтобы при их минимальном значении принять решение о вакцинации.

Если антитела не обнаружены, иммунитет к коронавирусной инфекции отсутствует.

Важно понимать, что вакцинация возможна только при определенном соотношении антител в крови. В момент течения заболевания или при сформированном долгосрочном защитном иммунитете вакцинация нежелательна, поскольку может вызвать осложнения. Принимать решение о проведении вакцинации может только врач на основе анализа крови на антитела к COVID-19.

Тест на антитела после вакцинации к COVID-19

Проверить, изменился ли уровень антител к COVID-19 после вакцинации, можно сдав тест на поздние антитела (IgG) через 21 день после второй фазы вакцины. Появление поздних антител (IgG) показывает ответ иммунной системы после вакцинирования от COVID-19.

По уровню антител IgM и IgG можно точно понять, в каком периоде болезни вы находитесь.
Если сохраняются антитела IgM, значит вирус еще находится в организме, острый период не закончился, и этим можно объяснить многие характерные симптомы.
Если определяются только антитела IgG, вы вышли из острого периода заболевания и получили защитный иммунитет.

Рекомендуем планово сдавать кровь на антитела IgM и IgG:

через две недели после начала заболевания, чтобы убедиться, что иммунная система борется с вирусом и начала формировать иммунитет;
через 1 месяц после начала заболевания, чтобы оценить соотношение IgM и IgG (уровень IgM должен снижаться, уровень IgG должен быть максимальным);
через 3 месяца после начала заболевания (убедиться, что антитела IgG продолжают определяться в защитном титре, и есть иммунитет против повторного заражения).

В условиях пандемии коронавируса никто не отменял другие острые респираторные вирусные инфекции (аденовирусные, риновирусные, грипп).

Если болезнь уже закончилась, мазок ПЦР из носа и горла не информативен. Только определение наличия и титра антител IgM и IgG к COVID-19 поможет правильно поставить диагноз и понять, была ли болезнь вызвана коронавирусом и есть ли защитный иммунитет против повторного заражения.

Точный диагноз имеет принципиальное значение для соблюдения защитных мер и планирования своей активности на ближайшие месяцы.

Определение антител IgM и IgG к коронавирусу для решения вопроса о вакцинации против COVID-19 абсолютно необходимо.

Наличие антител IgM свидетельствует об остром периоде заболевания, вакцинация противопоказана, т.к. может вызвать существенные осложнения и усиление инфекции.

Наличие изолированно антител IgG свидетельствует о наличии защитного иммунитета против коронавируса, вакцинация не обязательна.

Лучшие условия для эффективной и безопасной вакцинации после перенесенного заболевания – отсутствие антител IgM и низкий титр антител IgG.

У достаточно большого количества людей коронавирусная инфекция протекает малосимптомно или бессимптомно. При этом формируется кратковременный (антитела IgM) или долгосрочный защитный иммунитет (антитела IgG). Вакцинироваться против коронавируса, имея ранние антитела IgM или высокий титр поздних антител IgG – опасно и неэффективно.

Чтобы точно убедиться, что заболевания не было, и вакцинация необходима – сдайте кровь на антитела IgM и IgG!

Вы можете сдать кровь на антитела в клиниках ЦНМТ. Срок готовности анализа 24 часа. Результат показывает титр антител, что позволяет определять уровень защиты при динамическом наблюдении.

Пройдите тестирование к COVID-19 в ЦНМТ и получите полную информацию о состоянии своего иммунитета к коронавирусной инфекции.

Антитела к коронавирусу (SARS-Cov2), IgG(ИФА, Abbot) полукол. сдать в Подольске и Королёве

Антитела к коронавирусу. Что важно знать. Коронавирусная инфекция изменила жизнь почти всей планеты в целом и каждого из нас в частности. Инфекция часто протекает без симптомов или в лёгкой форме.

Как узнать, переболел я или нет (ведь кашлял же зимой)? Являюсь ли безопасным для окружающих? Могу без страха навещать бабушку, маму, друзей? Эти и другие вопросы волнуют многих людей. Прошло достаточно времени чтобы появилась возможность ответить на них. Для оценки возможного иммунитета есть скрининговое исследование на антитела к коронавирусу (IgM и IgG).

Коронавирусная инфекция «Имя» коронавируса, вызвавшего пандемию – CoV-2 (сокращённо от Corona Virus 2), или SARS-CoV-2 . Заболевание, вызванное CoV-2, называется COVID (от англ. COrona VIrus Disease). Опасен развитием двустороннего воспаления лёгких и острой дыхательной недостаточности.

Проявления напоминают ОРВИ, но настораживает сухой кашель без отделения мокроты, боли в мышцах, одышка, чувство сдавления в груди. При острых признаках заболевания исследуют мазки из зева методом ПЦР, который выявляет генетический материал возбудителя (РНК) и подтверждает диагноз.

Что такое антитела к коронавирусу? Антитела, или иммуноглобулины – специальные белки, которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого инфекционного агента, в том числе CoV-2 в организм человека, даже если не было ярких признаков болезни. Антитела распознают коронавирус, обезвреживают и сохраняют информацию об инфекции на случай новой встречи с инфекцией.

Как образуются антитела? На первой неделе заболевания начинают синтезироваться иммуноглобулины М (IgM). Они первыми встречаются с инфекцией, поэтому считаются маркерами острой первичной инфекции. Однако, тест на определение антител класса М может давать неспецифическую реакцию, что в ряде случаев приводит к ложноположительному результату.

Поскольку на антитела класса М возложена ответственность первыми начать отражать инфекцию и сделать максимально быстро, то эти белки не очень специфичны и могут не очень точно улавливать вирус.

К неспецифической реакции с тест- системой могут привести процессы, связанные с воспалением в организме: острые и хронические воспалительные процессы, аутоиммунные заболевания, проблемы с щитовидной железой, беременность и так далее. Это называется «ложноположительный» результат.

При стандартном инфекционном заболевании (в том числе и при коронавирусной инфекции) обычно антитела IgM через месяц исчезают, заменяясь на более специфичные антитела IgG. Однако учёные выяснили, что при коронавирусе IgM могут сохраняться длительное время (до 1,5-3 месяцев от появления симптомов, когда уже сам вирус давно не обнаруживается).

Иммуноглобулины А (IgA) также вырабатываются в острый период инфекции. Их основная цель – защитить слизистые оболочки от коронавируса. IgA более избирательны (специфичны), вырабатываются строго на коронавирус. Их уровень снижается после выздоровления, примерно к 1,5- 2 месяцам после инфицирования.

Иммуноглобулины G (IgG) синтезируются последними, через 5-6 недель с момента попадания вируса в организм, и сохраняют информацию о коронавирусе. Обычно IgG являются архивом памяти перенесеных инфекций, в большинстве случаев пожизненно, либо на несколько лет. Механизмы развития иммунной реакции на коронавирус пока изучаются. Неясно, стойкий иммунитет формируется или нет.

Это предстоит узнать. Но в любом случае, выявление IgG свидетельствует о факте попадания коронавируса в организм и иммунном ответе организма. Лаборатория KDL представляет линейку тестов на определение антител к новой коронавирусной инфекции. Кому они показаны? Тем, кто хочет узнать, перенес он инфекцию или нет независимо от того, были признаки простуды или не было.

Только следует понять, что если были подозрительные признаки, целесообразнее обследоваться на IgG спустя 5 недель от предполагаемого периода. Если признаков не было, сроки неважны, обследуйтесь в любое время.

Тем, кто подозревает течение коронавирусной инфекции сейчас или перенес в недавнее время, даже если проводили исследование мазка из зева методом ПЦР и он показал отрицательный результат. Иногда такое бывает. Также возможно анонимное выполнение исследование на антитела к коронавирусу с указанием возраста и пола. Давайте о каждом исследовании по порядку.

Антитела IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2. Это комплексный тест, скрининговый. Одновременно определяет иммуноглобулины классов М и G, результат по каждому антителу. Выполняется иммунохроматографическим методом (ИХГА). Ответ выдаётся в формате «обнаружено/не обнаружено».

Как понимать результат исследования? Если Ig M (+) обнаружены, IgG (-)не обнаружены: Может быть признаком острой инфекции, особенно при наличии признаков заболевания. Возможен ложноположительный результат (при хронических заболеваниях) Поэтому целесообразно провести исследование мазка из зева методом ПЦР.

Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели.

Если IgM (+) обнаружены, IgG (+) обнаружены: Возможна текущая инфекция, начало выздоровления или недавно перенесенное заболевание Если IgM (-) не обнаружены, IgG (+) обнаружены: Свидетельствует о перенесенном ранее COVID-19 Если IgM (-) не обнаружены, IgG (-) не обнаружены: Пациент еще не встречался с вирусом Антитела IgA к коронавирусу SARS-CoV-2.

Тест выполняется методом ИФА на анализаторе, производитель Евроиммун, Германия. Результат выдается в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП). IgA – показатели ранней инфекции, являются более точными в отличие от IgM, поскольку более специфичны. Как правильно прочитать результат? Положительный результат – более 1,1.

Говорит об обнаружении IgA и может означать: Текущую инфекцию сейчас ( в частности, бессимптомное течение) Если одновременно определяются IgG, то это период выздоровления или недавно перенесенная инфекция Пограничный результат – в интервале 0,8 – 1,1.

Требует повторного исследования через 2 недели, поскольку может означать: Начальный период инфекции, когда не успели сформироваться антитела в достаточном количестве. Как правило, в таком случае есть признаки болезни и требуется подтверждение методом ПЦР (мазок из зева). Тогда через 2 недели будет отмечаться нарастание IgA. Отрицательный результат –менее 0,8.

Означает отсутствие антител IgA, что возможно, если: Пациент не встречался с коронавирусом SARS-CoV-2 Самое начало болезни, когда ещё нет иммунного ответа. При наличии проявлений правильно исследовать мазок из зева на ПЦР. Антитела IgG к коронавирусу SARS-CoV-2. Исследование выполняется на анализаторе методом ИФА, производитель Евроиммун, Германия. Результат в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП). Расшифровка результатов: Положительный результат –более 1,1. IgG выявлены, а это может быть в следующих случаях: Сформирован иммунитет после давно перенесенной инфекции. Тогда антитела IgM и IgA отсутствуют Текущая инфекция в стадии выздоровления или недавно перенесенная – если определяются одновременно IgA и/или IgM Пограничный результат –в интервале 0,8 – 1,1. Возможно, IgG ещё немного, что требует повторить исследование через 2 недели и возможно, когда: Инфекция протекает менее 5-6 недель. Тогда есть признаки болезни, может быть положительный ПЦР и антитела IgM, IgA. Антитела IgG при повторном исследовании в таком случае возрастут. Неспецифическая реакция иммунной системы (очень редко). Тогда повторно тест будет отрицательный. Отрицательный результат –менее 0,8. IgG не обнаружены, что может быть, если: Не было встречи с SARS-CoV-2 (тогда нет IgA, IgM) Острая инфекция. При наличии проявлений следует проверить IgA, IgM и мазок на ПЦР. Обнаружение антител IgG к коронавирусу SARS-CoV-2. Выполняется методом ИФА, методика автоматизированная, тест-системы российского производства. Заключение в виде цифры (коэффициент позитивности) Референсные значения: менее 0,9 – отрицательный результат 0,9 – 1,0 – пограничный результат более 1,0 – положительный результат Выявление антител класса IgG говорит о наличии иммунного ответа на встречу с инфекцией в прошлом и является признаком перенесенного заболевания

С признаками ОРВИ и температурой не принимаем.

Нужна ли специальная подготовка для определения антител к коронавирусу? Подготовка не нужна. Для исследования сдаётся венозная кровь утром натощак или днём в часы работы медицинских офисов через 3 часа после еды. Чистую воду без газа пить можно.

Обращаю Ваше внимание, что все результаты исследований должен интерпретировать врач! Ведь полноценная картина складывается из данных истории болезни, осмотра, лабораторных и инструментальных данных.

Будьте здоровы с лабораторией KDL, берегите себя и близких!

2 дня, не считая дня забора биоматериала

Скидка 15 % на анализы

Действует до: 30.06.2021

Опыт использования метода ПЦР для выявления РНК (ДНК) возбудителей вирусных гепатитов В и С у серонегативных доноров

О.А. Тарасенко, И.А. Гукасян, Л.В.Соболевская, Т.В. Черненко

Станция переливания крови Департамента Здравоохранения г. Москвы

В настоящее время исследование образцов донорской крови на маркеры вирусных гепатитов В (ВГВ) и С (ВГС) проводят серологическими методами: иммуноферментным (ИФА) или иммунохемилюминисцентным (ИХЛА) анализом, позволяющими определять наличие в них поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) и антител к белкам ВГС (анти HCV). Введение в лабораторную практику службы крови обязательного тестирования донорской крови на указанные серологические маркеры ВГВ и ВГС позволило значительно снизить риск посттрансфузионной передачи ВГС и ВГВ.

Известно, однако, что при ВГС специфические антитела появляются в среднем через 10-12 недель от момента заражения, а в некоторых случаях сроки их появления могут отодвигаться до 30-50 недель [2,6].

Поэтому при исследовании методами ИФА или ИХЛА образцов крови, взятой от донора с ранней стадией ВГС, когда антитела еще не выявляются (период, так называемого, серонегативного окна), получают, как правило, ложноотрицательный результат.

В то же время именно в этот период ВГС наблюдается, выраженная виремия и связанная с ней высокая « инфекционная способность» инфицированной крови [3 ]. В связи с этим компоненты крови, заготовленные от донора, находящегося в периоде «серонегативного окна», являются основным источником заражения реципиента ВГС при гемотрансфузии.

Использование NAT-технологий, в частности метода ПЦР, позволяет выявить РНК HCV в крови уже через 1-2 недели после заражения, т.е. приблизительно за 60 дней до выявления в ней антител к HCV серологическими тестами.

HBsAg в большинстве случаев является наиболее значимым серологическим маркером острого и хронического ВГВ, выявление которого в крови свидетельствует с высокой степенью вероятности о присутствии в ней вируса . Однако, зарегистрированы случаи заражения ВГВ при переливании HBsAg-негативной крови.

В настоящее время известно о существовании по крайней мере двух «ускользающих (escape)» мутантов HBsAg [9,13], которые могут возникать как естественным путем в ходе инфекционного процесса, так и после противовирусной терапии.

Эти штаммы HBV способны передаваться горизонтальным путем и обусловливать ложно негативный результат при скрининге донорской крови на HBsAg. Описана, так называемая, «молчащая» форма ВГВ, характеризующаяся наличием низких концентраций вируса в крови при не детектируемом уровне HBsAg [2, 11].

Она может наблюдаться у некоторых больных после острого ВГВ с самостоятельным разрешением и даже после успешно проведенного противовирусного лечения, а также при хроническом ВГВ.

Установлено, что «молчащая» инфекция представляет клиническую форму ВГВ, способную передаваться через компоненты крови, а диагностика ее основывается на тщательном сборе анамнеза и применении высокочувствительного метода ПЦР для определения вирусной ДНК [1].

Задачей настоящей работы было оценить целесообразность использования метода ПЦР для скрининга донорской крови на маркеры ВГС ВГВ.
Пробы крови от каждого донора забирали в 2 пробирки: одну пробирку с разделительным гелем для получения сыворотки для серологических исследований и вторую пробирку с ЭДТА для получения плазмы для ПЦР.
Скрининг донорских сывороток на серологические маркеры ВИЧ 1,2, ВГВ и ВГС проводили методом ИФА на аппарате Evolis (компания Biorad, США) или методом ИХЛА на аппарате Architect (компания Abott, США).
Для определения антител к HCV методами ИФА и ИХЛА использовали, соответственно, тест-системы Murex anti HCV (Abbott, США) и тест-системы Architect anti HCV (компания Abbott, США).
Для выявления HBsAg методом ИФА использовали тест-системы Monolisa HBsAg Ultra (Bio-Rad, США) и тест-системы Architect HBsAg (компания Abbott, США).
Образцы, показавшие при первичном исследовании в ИФА или ИХЛА положительный результат на анти ВИЧ 1,2, анти HCV или HBsAg, отбирали для повторного исследования в тех же тест-системах и подтверждающих тестах.
Все серонегативные образцы исследовали методом ПЦР на наличие РНК HIV, HCV и ДНК HBV.
В течение 2008 года ПЦР-исследования проводили на аппаратах Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor ( компания Roch, Швейцария) с использованием тест-систем: Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor HIV 1 Monitor Test , Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor HCV Test и Cobas Amplicor HBV Monitor Test.

С января 2009 года исследования выполняли методом ПЦР в режиме реального времени на инструментальном комплексе Cobas 201 (Roche.

Швейцария), включающем пипетирующую рабочую станцию, аппарат для автоматического выделения нуклеиновых кислот Cobas Ampliprep и анализатор Cobas Taqman для автоматического проведения амплификации и детектирования нуклеиновых кислот с использованием 5 нуклеазной технологии.

Многоканальные оптические системы прибора позволяют регистрировать флуоресцентный сигнал от исследуемого образца в каждом цикле ПЦР. Для ПЦР-анализа серонегативных образцов использовали мультиплексные тест-системы CobasTaqScreen MPX Test, разработанные компанией Roche специально для скрининга донорской крови [10].

За счет включения в реакционную смесь различных пар специфических праймеров и зондов эти системы позволяют выявлять одновременно в одной пробирке РНК HIV-1 rpyппы М и группы О, HIV-2, HCV и ДНК HBV. Образцы, при исследовании которых регистрировали нарастание флуоресцентного сигнала, считали положительными, т.е.

содержащими вирусную РНК (ДНК). Такие образцы исследовали повторно в той же тест-системе. При получении повторно положительного результата проводили идентификацию выявленной нуклеиновой кислоты с помощью указанных выше ПЦР-диагностикумов на отдельные инфекции.

Результаты исследования представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1 — Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом ПЦР на комплексе Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor

Количество исследований	Количество образцов, содержащих:
PHKHCV	РНК HIV	ДНК HBV
56 983	8

Таблица 2 — Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом ПЦР на комплексе Cobas S 201

Количество исследований	Количество положительных результатов в тесте МРХ	Количество положительных результатов в дискриминаторном тесте на:
РНК HCV	РНК HIV	ДНК HBV
62 438	31	16	4

При исследовании 56983 серонегативных образцов донорской плазмы на наличие вирусной РНК (ДНК) на аппаратах Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor с помощью диагностических тест-систем на отдельные иифекции (табл.1) было выявлено 8 образцов, содержащих РНК HCV. При этом РНК HIV-1 и ДНК HBV ни в одном из исследованных образцов выявлено не было.

При исследовании 62438 серонегативных образцов на аппаратном комплексе Cobas 201 с помощью тест-систем CobasTagScreen МРХ в 31 случае было зарегистрировано нарастание флуоресцентного сигнала, свидетельствующее о наличии в образце вирусной РНК (ДНК) (табл.2).

Дискриминаторный анализ этих образцов с помощью тест- систем на отдельные инфекции выявил в 16-и из них РНК HCV, в 4-х. других- ДНК HBV в низкой концентрации (менее 60 IU./ml).

Остальные 11 образцов, положительные в тесте CobasTagScreen МРХ, показали отрицательный результат в индивидуальных тестах на РНК HIV-1, РНК HCV и ДНК HBV.

Однако при исследовании образцов, содержащих ДНК HBV и образцов с не идентифицированной нуклеиновой кислотой на наличие антиНВсоr во всех случаях выявили выраженную серологическую реакцию (коэффициент позитивности колебался от 7,8 до 8,6) (табл.3).

Таблица 3 — Выявление ДНК HBV у серонегативных доноров

№ п/п	Результат скринингового теста	Результат ПЦР-теста на ДНК HBV	Наличие Anti НВсог	Наличие Anti HBs
1	+	—	+	—
2	+	+	+	—
3	+	—	+	—
4	+	—	+	+
5	+	+	+	—
6	+	—	+
7	+	—	+	—
8	+	+	+	—
9	+	—	+	+
10	+	—	+	—
11	+	+	+	_
12	+	—	+	+
13	+	—	+	—
14	+	—	+	+
15	+	—	—	—

В 4-х образцах были также обнаружены антитела к HBsAg . Наличие в образцах с не идентифицированной нуклеиновой кислотой серологических маркеров HBV инфекции позволяет считать, что в них присутствует ДНК HBV в концентрации ниже предела чувствительности теста Cobas Amplicor HBV Monitor (40 IU/ml), выявляемая, однако, более чувствительной тест-системой CobasTagScreen MPX (3,3-4,4 IU/ml).

Обобщая полученные результаты, мы установили, что методом ПЦР из 119421 образцов донорской плазмы, показавших отрицательный результат в серологических тестах, выявлено 24 образца (0,02%), содержащих РНК HCV. 16 HCV -позитивных образцов имели нормальный уровень трансаминаз, в то время как в 8-и других был зарегистрирован повышенный уровень активности АЛТ.

Подобная картина может наблюдаться как при ранней инфекции (период серонегативного окна), так и при хроническом ВГС у лиц с подавленным иммунитетом.

Данные литературы, свидетельствующие об отсутствии прямой зависимости между уровнем АЛТ и наличием РНК HCV в сыворотке крови [4] позволяют считать, что обнаружение РНК HCV в крови является наиболее информативным показателем HCV-инфекции в период серонегативного окна.

Также нами было выявлено 11 случаев ВГВ у HBsAg негативных доноров. В 4-х из них низкий уровень виремии сохранялся несмотря на наличие анти- HBS. Известно, что подобное состояние иногда может наблюдаться длительное время после клинического выздоровления от острого ВГВ.

Предполагают, что персистенция вируса в этом: случае может осуществляться в форме иммунного комплекса с анти-HBs [11]. В остальных случаях сочетание низкого уровня виремии с наличием только анти-НВсог скорее укладывается в картину «молчащей» формы хронического ГВ.

Считают, что отрицательные результаты при детекции HBsAg у больных ВГВ могут быть вызваны низким уровнем HBsAg, образованием иммунных комплексов, а также мутациями вируса в S-регионе [11,17]. Механизмы, поддерживающие низкий уровень репликации вируса при «молчащей» форме ГВ нуждаются в дальнейшем изучении.

В настоящее время к факторам, способным поддерживать персистенцию вируса в крови при «молчащей» HBV- инфекции относят инфицирование вирусом моноцитов крови, формирование иммунных комплексов с антителами, ослабленный иммунитет и коинфекцию [11,17].

Таким образом, на основании полученных результатов можно заключить, что скрининг образцов донорской крови с применением ПЦР-тестирования для выявления вирусной РНК (ДНК) позволит снизить риск посттрансфузионной передачи вирусных гепатитов В и С, за счет выявления инфицированных доноров, находящихся в периоде серонегативного окна и доноров с молчащей формой инфекции.

Алгоритм апробации донорской крови, при котором скрининг образцов методом ПЦР проводят одновременно с исследованием их в серологических тестах, позволит не только повысить инфекционную безопасность гемопродукции, но и сократить промежуток времени от момента забора крови до выдачи ее в лечебные учреждения, что особенно важно для сохранения компонентов с ограниченным сроком годности.

ЛИТЕРАТУРА

1. Амосов А.Д. Гепатит В (издание 2). Кольцов, 2001.- 128 с.

2. Голосова Т..В., Никитин И.К. Гемотрансмиссивные инфекции.- М.., 2003.- 191 с.

3. Карякин А.В., Скоцеляс Е.Д., Терентьева Л.А. Мониторинг безопасности донорского контингента России//Трансфузиология, 2007.- №1-2.- с.21.

4. Майер К.П. Острый вирусный гепатит С.// В кн.: Гепатит и последствия гепатита. /Пер. с нем.- М.: ГЭОТАР Медицина,. 1999.- с.91-98.

5. Малышев B.C., Федорова В.Д., Потехин О.Е. Маркеры вирусного гепатита В у доноров крови и в группах сравнения // Иммунопатология, аллергология, инфектология.-1999.- №1.- с.103-105.

6. Рагимов А.А., Дашкова Н.Г. Основы трансфузионной иммунологии. — М., 2004.-280 с.

7. Allain J.P. Occult hepatitis В virus infection: implication in transfusion. // Vox Sang., 2004, Vol.86, N.2, p.83-91.

Доктор Мак

Антитела «+», РНК «-» — советы врачей на каждый день