Почему в разных лаборатория разные результаты анализов — советы врачей на каждый день

Сейчас многие тестируются на антитела к «короне»: кто-то хочет знать, не переболел ли он бессимптомно, кто-то — оценить состояние после прививки. Лаборатории предлагают разные тесты — и наши, и зарубежные. Как не запутаться и сдать именно тот анализ, какой нужен? На вопросы «РГ-Неделе» ответил глава НЦ молекулярно-генетических исследований ДНКОМ Андрей Исаев.

Для ПЦР-теста берется мазок из носоглотки, а для теста на антитела берут кровь из вены. Getty Images

Тесты выполняются на наличие антител (иммуноглобулинов) IgA, IgM и IgG.

— Антитела IgA первыми вырабатываются нашей иммунной системой в ответ на вторжение вируса — если тест на них положительный, значит, человек находится в острой фазе заболевания (даже если у него нет симптомов).

— Антитела IgM начинают вырабатываться позже, где-то на 3-4-й день после возникновения симптомов — этот тип антител также является маркером первичной инфекции. Обычно исследование на антитела IgM используется как вспомогательное — для уточнения фазы инфекционного процесса.

— Антитела IgG начинают вырабатываться примерно через 10-14 дней после появления симптомов. Их появление указывает на то, что у человека сформировался долговременный иммунитет. То есть речь идет либо о поздней фазе заболевания, когда больной уже выздоравливает, либо о том, что человек переболел COVID-19 раньше.

Какой тест можно сделать перед прививкой?

Сейчас тесты на антитела IgG чаще всего выполняют люди, которые собираются пройти вакцинацию, чтобы убедиться, что они не перенесли COVID-19 раньше бессимптомно и у них нет иммунитета, полученного естественным путем. Если тест показывает положительный титр антител IgG, вакцинацию можно отложить.

Прибывших из-за границы россиян обяжут сдавать тест на COVID-19 дважды

А если человек хочет проверить уровень антител после прививки? Сейчас многие сравнивают свои показатели.

Надо понимать, что тесты, которые используют в лабораториях, разные и шкалы у них используются тоже разные. Поэтому если пытаться сравнивать результаты (хотя большого смысла в этом нет), то надо по меньшей мере быть уверенным, что вы выполняли тестирование одним и тем же тестом.

Что такое «коэффициент позитивности»?

Для определения уровня антител после прививки в большинстве случаев используются полуколичественные тесты. Они не показывают точное количество образовавшихся антител. Но с их помощью можно оценить интенсивность иммунного ответа — по яркости свечения образца, если тест проводится методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Тесты разных производителей имеют разную шкалу. В большинстве случаев в государственных лабораториях используют тест-системы «Вектор-бест», и у них уровень отсечки равен 1. То есть если показатель ниже — антител нет. От 1 до 1,1 — так называемая серая зона. Если же результат выше 1,1 — значит, мы имеем яркую положительную реакцию иммунной системы.

«Коэффициент позитивности» показывает, во сколько раз уровень антител в пробе превышает пороговый уровень их распознавания. Так что, например, показатель 15, о котором недавно сказал президент, — это хороший результат. Примерно такой же и даже больше коэффициент позитивности иммунного ответа имеют большинство привитых «Спутником V» или «КовиВаком».

При этом еще раз отмечу, что у других производителей тестов шкала может быть другой и показатели, соответственно, тоже. При этом, получая результат теста в лаборатории, вы всегда можете увидеть на бланке референсные значения и сравнить результат с ними.

Каким тестом можно проверить поствакцинальный иммунитет?

Такой тест называется «Количественное определение антител к RBD домену S1 белка коронавируса (антитела IgG)» (выполняется методом хемилюминесцентного иммуноанализа сыворотки и плазмы крови, Abbot).

Это количественный анализ на IgG-антитела. Он поможет оценить иммунный ответ и в случае заражения (или перенесенного COVID-19), и для контроля поствакцинального иммунитета.

• Когда делать:
• — на текущую или перенесенную инфекцию не ранее чем через три недели после появления симптомов или получения положительного результата ПЦР-теста;
• — для оценки поствакцинального иммунитета через три недели после второй дозы вакцины.

Во всех аэропортах пассажиров информируют о необходимости тестирования. Валерий Шарифулин / ТАСС

1. О чем говорят результаты:
2. < 50.0 AU/mL отрицательно:
3. антитела к патогену отсутствуют или на очень низком уровне.
4. Это может быть период ранней инфекции или у пациента не исключены нарушения функций иммунной системы.
5. ≥ 50.0 AU/mL положительно:
6. есть иммунный ответ на инфекцию либо сформировался поствакцинальный ответ.

Нужны ли повторные исследования?

Со временем напряженность иммунитета и в случае перенесенного заболевания, и после вакцинации уменьшается. По мнению инфекционистов, чем выше уровень антител, тем ниже риск повторного заражения, а также вероятность тяжелого течения и осложнений при COVID-19.

При этом делать повторный тест, чтобы оценить, как падает уровень антител, рекомендуется не чаще чем раз в полгода.

Есть тесты на антитела, которые не показывают поствакцинальный иммунитет?

Да. Это, например, тест на «Антитела к нуклеокапсидному белку (N) коронавируса IgG (выполняется методом хемилюминесцентного иммуноанализа сыворотки и плазмы крови, Abbot).

Этот тест не используется для оценки иммунного статуса после прививки. Дело в том, что антитела к нуклеокапсидному белку (N) вируса SARS-CoV-2 вырабатываются только после перенесенного заболевания. Вакцинация выработку этих антител не стимулирует, поэтому этот тест бесполезно применять для оценки поствакцинального иммунитета.

Этот тест назначают:

• для оценки предполагаемого иммунного статуса пациента после перенесенного или на поздней фазе (выздоровление) заболевания COVID-19;
• для оценки иммунного статуса пациента, в качестве вспомогательного метода диагностики коронавирусной инфекции, совместно с результатами других лабораторных исследований и клинических данных о пациенте.

• О чем говорят результаты
• отрицательно < 1,4 - negative (антитела не обнаружены);
• положительно > 1,4 — positive (антитела обнаружены).

Для чего нужно сдавать ПЦР-тест на COVID-19?

Этот тест сдается, чтобы проверить, болен ли человек или, возможно, является носителем вируса (даже если у него нет никаких симптомов нездоровья), выделяет ли он в настоящий момент вирус из верхних дыхательных путей, то есть является источником инфекции для окружающих.

Путин назвал стабильной ситуацию с коронавирусом в России

Это единственный и ставший уже стандартным тест для туристов: при въезде практически все страны требуют предъявить справку о тесте, сданном перед отъездом. После возвращения из поездки тест придется сдать еще дважды и результат загрузить на портал госуслуг.

Кроме того, можно сдать ПЦР-тест, чтобы убедиться, что вы здоровы, то есть исключить бессимптомное течение заболевания.

Это может понадобиться, если, например, вам предстоит встреча с пожилыми родственниками и вы не хотите рисковать их здоровьем.

Кроме того, с помощью такого тестирования можно проверить, не заразились ли вы коронавирусом, если вы точно знаете, что контактировали с заболевшим.

Как правильно сдавать тесты?

Для теста ПЦР: берется мазок биоматериала со слизистой носоглотки. Анализ сдается натощак либо через три часа (или позже) после еды. За три часа до взятия мазка нельзя чистить зубы, полоскать рот, пить, жевать жевательную резинку, применять антисептические таблетки, полоскания и спреи.

https://www.youtube.com/watch?v=4XIlqYRQZnE

Для теста на антитела: берется кровь из вены. Сдавать кровь нужно натощак утром или днем не менее чем через четыре часа после последнего приема пищи.

Анализы на гепатит С в лаборатории: как проводятся и почему различаются результаты

ВГС – гепатотропный вирус, провоцирующий воспаление печеночных клеток (гепатоцитов). Чтобы выявить в лаборатории гепатит С, выполняют 2 типа анализов – ПЦР и ИФА. Результаты исследования оцениваются в соответствии с референсными (нормальными) значениями, которые могут различаться в разных диагностических центрах. Они зависят от многих факторов – применяемого оборудования, тест-систем, реагентов. Поэтому при одновременной сдаче анализов в двух-трех лабораториях цифровые данные напротив одних и тех же пунктов будут отличаться.

Основные лабораторные анализы на ВГС

Анализы на вирус гепатита С (ВГС) – лабораторные исследования, в рамках которых выявляют антитела и вирусную РНК возбудителя. Они назначаются лицам из группы риска по заражению гепатитом С и при симптомах воспаления печени. При подозрении на HCV-инфекцию надо сдать только 2 теста:

• ИФА на антитела к HCV (anti-HCV) – серологическое исследование, которое основано на выявлении иммуноглобулинов к возбудителю инфекции. Они обнаруживаются спустя 6-8 недель после заражения.

• Качественную ПЦР (HCV-RNA, qualitative) – молекулярно-биологическое исследование, которое выполняется в рамках скринингового обследования. Посредством специальных реагентов в сыворотке крови выявляют генетический материал возбудителя. Если РНК HCV обнаруживается, диагноз подтверждается.

В случае выявления вирусной инфекции необходимо определить структурные изменения в печени, активность инфекционного процесса, генотип возбудителя.

При положительных результатах скринингового обследования пациенты повторно обращаются в лабораторию для сдачи дополнительных анализов:

1. Количественная ПЦР (HCV-RNA quantitative) – оценка вирусной нагрузки, от которой зависит прогноз течения гепатита. Для ее определения в лаборатории подсчитывают количество копий ВГС в 1 мл крови.
2. Anti-HCV-total – определение суммарных антител к структурным и неструктурным белкам HCV. Иммуноглобулины класса M обнаруживаются через 1-1.5 месяца, а класса G – через 3 месяца после инфицирования. По их концентрации уточняют стадию заболевания.
3. Генотипирование (HCV-RNA, genotyping) – уточнение генотипа и субтипа возбудителя гепатита. В РФ встречаются преимущественно первые 4 генотипа ВГС. Поэтому в лабораториях используются специальные реактивы, которые не выявляют другие штаммы вируса.

Чтобы определить серьезность структурных изменений в печени, выполняют инструментальное обследование – УЗИ, биопсию, фибросканирование.

Почему в разных лабораториях бывают разные результаты

При обследовании врачи советуют сдавать тесты в одной и той же лаборатории. В диагностических центрах получаются разные результаты тестов, хотя в действительности они обозначают одно и то же. Причин этому несколько:

• использование неодинакового диагностического оборудования и тест-систем;

• приведение данных исследований в разных единицах измерения (Ед/л, мЕд/л, мкМЕ/мл);

• применение разных методик определения нужного показателя.

Референсные интервалы в лабораториях напрямую зависят от используемого оборудования и метода проведения анализа.

В лабораториях выполняют 2 типа тестов:

1. Качественные. Результаты исследований выражаются не в цифровом, а в словесном формате – отрицательно или положительно. В случае выявления вируса гепатита в ходе кач. ПЦР-анализа в графе «Результаты» будет написано «Положительно».
2. Количественные. При подсчете копий вирусной РНК и антител к ВГС данные выражаются в цифровом формате. Они сравниваются с нормой, которая в лабораториях может отличаться. Именно поэтому в бланке рядом с полученными результатами обязательно указываются нормальные значения.

Единого диапазона нормальных значений для лабораторий нет. Поэтому перед и во время лечения гепатита С тесты нужно сдавать в одном и том же диагностическом центре.

Что делать, если анализы не совпадают

Специалисты советуют проходить обследование на гепатит С в государственных или частных диагностических центрах, которые имеют сертификаты качества европейского образца. Несовпадение результатов исследований при диагностике гепатита С обусловлено разными причинами:

• сдача анализов в разных лабораториях;

• нарушение лаборантом техники проведения анализа;

• несоблюдение пациентом правил подготовки к забору биоматериала.

На данные исследований влияют разные факторы – употребление алкоголя и жирной пищи, прием пероральных медикаментов, сопутствующие болезни.

Присутствие в крови ревматоидного фактора иногда становится причиной ложноположительных результатов на гепатит С. Поэтому при получении сомнительных данных проводят повторное исследование.

Почему результаты медицинских анализов разных лабораторий не совпадают?

Очень часто люди, которые озабочены своим здоровьем, для перестраховки сдают анализы сначала в одной лаборатории, а затем в другой. И очень удивляются, получив результаты, которые совпадают далеко не во всем.

Действительно, почти в любом городе можно сдать анализы в разных местах. Конечно, это не получится сделать в один день — хотя бы потому, что во многих случаях анализы сдаются утром и натощак, и поездку сразу в две лаборатории не каждый выдержит. Но почему отличаются результаты медицинских анализов?

Причина первая, основная — заключается в том, что уровень вещества, которое берет на анализ лаборатория, может меняться в течение дня и недели. Такие колебания вполне естественны — они зависят от индивидуальных особенностей организма, факторов среды, рациона питания, условий, в которых берется биоматериал.

Что еще влияет на эти колебания? Физическое состояние человека, его суточные ритмы и даже психологическое спокойствие или, наоборот, беспокойство. Гормональный фон зависит от времени суток, еды и других факторов. А уровень антител в случае болезни регулируется иммунной системой и тоже может меняться.

Поэтому даже классическая формула «утром и натощак» не гарантирует, что результаты будут одинаковыми, если сдать анализы с перерывом в день или два.

Причина вторая — в самих методах проведения. Дело в том, что лаборатории зачастую используют отличающиеся технологии. Различия могут быть и в приборах, и в химических реагентах, и в методиках проведения тестов, и в условиях взятия биоматериала, и в системе контроля качества. В результате одна лаборатория выдаст одни результаты, вторая — другие.

Третья причина заключается в самих технологиях. Специалисты утверждают, что даже если исследовать на одинаковом оборудовании два одинаковых образца, взятых в одно и то же время, можно получить немного разные результаты.

Просто оборудование и используемые для анализов реагенты могут подвергаться температурным, электромагнитным и другим воздействиям, что в итоге влияет на конечный результат.

Конечно, современные технологии сводят внешние факторы к минимуму, но не исключают их полностью.

Что делать человеку, который задумался, где сдать анализы? Идти в две разные лаборатории? Пожалуй, это не лучший способ. Куда эффективнее будет обратиться в одну и ту же, но спустя некоторое время.

ПСА: результат результату рознь

Наталия Алексеевна Липатова К.м.н., врач высшей категории, руководитель медотдела медицинской лаборатории KDL [email protected]

Ежегодно от рака предстательной железы (РПЖ) во всем мире погибает более 200 тыс. мужчин.

Определение уровня простатспецифического антигена (ПСА) в сыворотке крови – приоритетный, но неоднозначный метод обнаружения заболевания на ранних стадиях.

Неправильная трактовка и неверное определение уровня ПСА могут стать причиной ошибок в тактике ведения пациентов. Правда, как выяснил корреспондент УС, путаницу вносят и сами пациенты, и врачи.

«Мужчин можно назвать счастливчиками: шансов умереть с раком предстательной железы гораздо больше, чем шансов умереть от рака предстательной железы, – написал Ричард Аблин в New York Times спустя 40 лет после открытия ПСА. –

Ежегодно около 30 млн американских мужчин проходят скрининг РПЖ и сдают анализ на ПСА: 16 % американских мужчин ставится диагноз рак предстательной железы, но только 3 % мужчин умирают от этого заболевания».

– Действительно, РПЖ по сравнению с другими опухолями развивается медленно, и лишь у немногих пациентов заболевание может быть агрессивным, – рассказывает Наталия Липатова, врач высшей категории, зав. медицинским отделом медицинской лаборатории KDL test.

В общем-то, исследования онкомаркеров, в том числе и ПСА, развивались с целью наблюдения за эффектом лечения. Это можно видеть и по эволюции клинической истории ПСА. Так, в 1986 г.

FDA (Food and Drug Administration) одобрило определение уровня ПСА у больных РПЖ методом Hybritech Tandem Total PSA с целью оценки эффективности лечения.

А спустя 8 лет FDA одобрило определение уровня ПСА данным методом уже для скрининга РПЖ.

Очень быстро определение ПСА стало распространенным и даже рутинным методом первичной диагностики РПЖ. В США, например, общий «ежегодный счет» на всех американцев, определивших свой уровень ПСА, превышает 3 млрд долларов, пишет Ричард Аблин в New York Times.

– В России анализ на ПСА можно сделать и по системе обязательного медицинского страхования, а можно и в коммерческой лаборатории. Для определения ПСА используются иммуохимические метод – объясняет Наталия Липатова.

– Определение ПСА происходит по специфической реакции взаимодействия антигена с антителом. Присоединение к антителам метки – ферментной или люминесцентной – позволяет оценить результат реакции антиген – антило по появлению изменения ферментативной активности, что приводит к смене окраски или степени свечения.

Результат реакции учитывается на специальных приборах: фотометрах или люминометрах. И если говорить о стандартизации, то уже на этом этапе возникают проблемы с полученными результатами. Так,методы хемилюминесценции в меньшей степени подвержены влиянию дополнительных факторов.

На результат иммуноферментного анализа может повлиять наличие инфекционных заболеваний, ревматоидного фактора и т. п.

Для определения ПСА методами хемилюминесценции используется закрытая аналитическая система – она почти на 100 % автоматическая, что сводит влияние человеческого фактора к минимуму.

Что касается открытых систем, используемых для иммуноферментного анализа, то работа на них – это на 80 % ручной труд. Это означает, что ошибки возможны на каждом этапе выполнения исследования. Закрытая система работает точнее, но стоит дороже.

Методик же определения ПСА достаточно много. В России представлена продукция как минимум 5 производителей закрытых анализаторов, еще десятка полтора открытых плашечных систем. При этом применяемые тест-системы отнюдь не взаимозаменяемы. Разнообразие методов и тест- систем для определения ПСА приводит к большой вариабельности результатов.

– На сегодняшний день нет никакого законодательного акта, стандартизирующего определение уровня ПСА, поэтому в разных лабораториях и получаются разные результаты, – продолжает Наталия Липатова.

В мониторинге рецидива РПЖ расхождения результатов ПСА могут иметь наиболее печальные последствия. Ведь при оценке рецидива заболевания важен прирост ПСА в сыворотке крови, даже в рамках референсных (пороговых) значений, однако не редки случаи, когда уровень ПСА, полученный в разных лабораториях, значительно различается.

– Важно, чтобы любой онкомаркер, не только ПСА, измерялся с помощью какой-то конкретной тест-системы.

А если пациент проходит обследование уже после радикального лечения РПЖ или наблюдается у врача, то большое значение имеет не уровень ПСА, а динамика его изменения.

Поэтому анализ должен проводиться не только на одном оборудовании, одной тест-системе, а еще и одними руками. Но это, конечно же, был бы идеальный вариант.

Одни руки и одна лаборатория? Многие пациенты этого не понимают и не знают, более того, зачастую пациенты любят перепроверять работу специалистов и «составляют мнение», вычисляя что-то среднее между заключениями и рекомендациями нескольких врачей и результатами, полученными в разных лабораториях.

– Если говорить о ПСА, то результаты, полученные в разных лабораториях, могут отличаться если не в разы, то в значительной степени. Бывало и такое, что пациенты приносили «пачки» результатов анализа на ПСА, выкладывали на стол и начинали требовать объяснений, почему они различаются.

С 1994 г. «золотым стандартом» определенияПСА считается метод, предложенный компанией Hybritec Corporation. Только для этого метода в рамках масштабного проспективного исследования было предложено пороговое значение ПСА 4 нг/мл. Но у каждого производителя есть своеноу-хау в отношении самого  технологического процесса, в подготовке антител и материалов.

А в 1995 г. A. Semjonov et al. показали, что различия в результатах исследования одних и тех же образцов сыворотки при тестировании всеми доступными в Германии методами могут достигать 100 %.

– С 1999 г. была запущена программа глобальной стандартизации, по итогам которой была предложена новая калибровка, – рассказывает Наталия Липатова.

– Результаты исследований,выполненных на иммунохимических анализаторах серии Access с использованием данной калибровки, на 20 % ниже результатов, полученных при использовании калибровки по стандарту Hybritech.

Читайте также:  У ребёнка красное горло - советы врачей на каждый день

Поэтому пороговое значение для теста Access Hybritech при калибровке ВОЗ составляет 3,1 нг/мл. В связи с этим все методы определения ПСА должны быть исследованы на предмет уточнения величины порогового значения.

Сейчас параллельно и равноправно существуют 2 стандарта калибровки ПСА, что вносит дополнительные проблемы в интерпретацию результатов. Поэтому для лаборатории важно определиться, с каким стандартом и с какими пороговыми значениями она работает.

Так, например, для лабораторий, использующих метод Access Hybritech Total PSA, на основании проведенного компанией Beсkman Coulter масштабного исследования было рекомендовано пороговое значение ПСА: 4 нг/мл для калибровки Hybritec или 3,1 для калибровки ВОЗ.

– В идеале каждая лаборатория на бланке результата исследования ПСА должна указывать тип калибровки, по которому она работает. Действительно, это важно: если лаборатория работает по стандарту (ВОЗ), то все получаемые значения ПСА будут ниже, и соответственно, используя неверное пороговое значение, можно пропустить патологию.

– Кроме того, сейчас обсуждается вопрос о снижении порогового значения ПСА до 2,5–3 нг/мл, – поясняет Наталия Липатова. – Относительно калибровки Hybritec это значительное снижение пороговой величины и увеличение чувствительности метода, а для калибровки ВОЗ – значение практически равное пороговому.

В заключение разговора Наталия Липатова обращает внимание на то, что необходимо использовать единую аналитическую платформу и понимать обоснованность использования пороговой диагностической величины. Более того, при выдаче результатов лаборатория должна указывать тип аналитической платформы, на которой выполнялось исследование, используемую калибровку и референсные значения.

– ПСА – один из основных компонентов, необходимых для своевременного выявления РПЖ. У ПСА есть «помощники».

Например, процент свободного ПСА, позволяющий дифференцировать доброкачественные и злокачественные новообразования простаты с достаточной чувствительностью, – чем выше % свободного ПСА, тем меньше вероятность рака.

Еще 1 дополнительный маркер, позволяющий улучшить диагностику РПЖ, – это [-2]проПСА, который секретируется в зоне наиболее частого расположения опухолей.

Сейчас большой интерес у клиницистов вызывает расчетный показатель PHI (Prostate Health Index), получаемый при объединении показателей ПСА, свободного ПСА и [-2]проПСА в одну расчетную формулу. Использование PHI повышает выявляемость рака простаты, позволяет сократить количество необоснованных биопсий предстательной железы, помогает выявить агрессивные формы РПЖ.

Еще существует молекулярно-генетический тест для раннего распознавания карциномы простаты – РCA3, который может служить критерием для определения целесообразности проведения биопсии, особенно у пациентов с повышенным уровнем ПСА.

Комплексное обследование пациента, включающее использование дополнительных методов,помогает врачу принять более информированное решение о направлении пациента на биопсию простаты, а значит – избежать ненужных болезненных и небезопасных манипуляций. Правда, пока что такие исследования не очень популярны и в силу высокой стоимости, и в силу своей новизны.

– Чтобы достичь каких-то успехов, необходимо не только соответствие единому стандарту,но и понимание особенностей аналитических исследований.

Наверное, для этого нужно просвещать и пациентов, и врачей, чтобы они понимали, почему у одного и того же человека уровень ПСА может быть нормальным или, наоборот, попадать в зону патологических значений в зависимости от того, какая калибровка была выбраналабораторией при выполнении исследования.

Средняя оценка:

»

Почему результаты из разных лабораторий отличаются? — ФОРМА

«Лабораторная норма» — это не то же, что нормальный результат анализа. Научное название «лабораторной нормы» — референсный интервал. Как правило, это диапазон средних значений конкретного лабораторного показателя, который получили при массовом обследовании здорового населения. Он и указан в бланке лабораторных анализов в разделе «норма».

Согласно международному протоколу Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI), для получения этого показателя нужно набрать от 20 до 120 здоровых добровольцев, взять у них образец биологического материала, провести анализ и расположить полученные результаты в ряд — от низкого к высокому. В середине окажется среднее значение, а 95% результатов, которые оказались по бокам от среднего, и будут диапазоном нормы. 

Каждая лаборатория для каждого показателя обязана рассчитывать собственный референсный интервал. Это логично, ведь в одном и том же городе результаты здоровых жителей промышленных районов могут отличаться от результатов здоровых жителей исторического центра. Они дышат воздухом разной чистоты, пьют воду разного качества, а еще у них разный уровень дохода, так что они по-разному питаются. 

Это означает, что в лаборатории из центра города референсные интервалы для одних и тех же показателей будут отличаться от референсных интервалов для лаборатории с окраины. Даже если эти лаборатории — сетевые, то есть реактивы и оборудование в них одинаковое. Но это — идеальная картина.

Чтобы сэкономить, многие лаборатории не рассчитывают собственные референсные интервалы, а берут указанные производителем в инструкциях к реактивам. Но у разных производителей они отличаются, так что «лабораторные нормы» в разных лабораториях все равно не будут одинаковыми.

В разных странах и медицинских организациях референсные интервалы могут не совпадать. Скажем, в России для тиреотропного гормона (ТТГ) — 0,4-5,0 мЕД/л, а в США — 0,3-5,0 мМЕ/л. Так получилось потому, что у 95% обследованных здоровых американцев предел по ТТГ оказался шире, чем у 95% здоровых русских.

Кстати, мЕД/л и  мМЕ/Л — одно и то же. «МЕ» расшифровывается как «международная единица», а «мМЕ» — «милли- международная единица». То есть русское сокращение так и расшифровывается — милли- международная единица на литр. 

Иногда договориться о референсных интервалах не могут даже медицинские учреждения одной страны. В США, например, часть профессиональных организаций считает, что минимальный уровень витамина D в крови начинается от 20 нг/мл, а часть — от 30 нг/мл. Проблемы из-за этого возникают не только у пациентов, но и у врачей, однако привести все референсные пределы к одному образцу пока невозможно. 

Главная трудность состоит в том, что результаты научных исследований, изучающих самочувствие людей с разным уровнем витамина D в крови, противоречат друг другу.

Такая проблема существует не только с витаминами, но и с многими другими лабораторными показателями.

Ничего не поделаешь: о работе человеческого организма пока известно далеко не все, так что медицина в целом и лабораторная диагностика в частности во многом остается вероятностной наукой.

Разные результаты

Оборудование и реактивы отличаются. Выше уже упоминалось, что референсные интервалы у разных производителей не одинаковые. Так происходит потому, что их наборы для определения одного и того же лабораторного показателя обладают разной чувствительностью. 

Например, когда китайские исследователи сравнили четыре коммерческих набора для определения коронавируса, выяснилось, что они немного отличаются. Более того, внутри одного и того же набора чувствительность варьировалась от партии к партии. Авторы работы даже предложили использовать реактивы из разных наборов: если одному набору не удалось «поймать» вирус, есть шанс, что удастся другому. 

В случае старых и проверенных тестов, которые давно используются в лабораторной практике — например, на общий белок, глюкозу или билирубин, внутри одной тест-системы результаты получаются более стабильными. Но если взять один и тот же образец и пропустить его через тест-системы разных производителей, результаты тоже будут отличаться.

Даже если оборудование и реактивы одни и те же, результаты все равно почти наверняка не будут одинаковыми. В первой лаборатории кровь могла брать медсестра с пятнадцатилетним стажем, а во второй — неопытная практикантка, которая с трудом нашла вену. Или в первом случае пациент пришел в обычном расположении духа, а во втором — после разрыва с любимым человеком. 

Боль и тоска — факторы стресса, а он способен повлиять на результаты анализов. Например, повышать уровень холестерина в крови. Даже если пациент сдавал анализы в один и тот же день, вероятно, что уровень холестерина в бланке из второй лаборатории будет выше, чем из первой.

Пациент сдавал анализы в разное время. Концентрация многих веществ в крови в течение дня меняется. Например, уровень «гормона сна» мелатонина сильно отличается утром и вечером.

А содержание глюкозы в крови до обеда будет ниже, чем после.

Поэтому, даже если пациент сдавал кровь в одной и той же лаборатории, одной и той же медсестре, и пребывал в одинаковом расположении духа, но делал это не в одно и то же  время, результаты получатся разными.

Как быть

Пересдать анализ в той же лаборатории в то же время. На этом варианте настаивает большинство лечащих врачей. Если пытаться сопоставить результаты, полученных в разных лабораториях, врач рискует ошибиться — то есть назначить пациенту неправильное лечение или пропустить начала осложнения.

Пересдавать нужно в той же лаборатории, в которой сдан первый тест. Ведь именно динамика «от первого к последующим» отображает изменения в состоянии пациента и реакцию на лечение.

Перевести результаты в одни единицы измерения и сравнить. Этот вариант подойдет тем, кто сдавал анализ «для себя» — например, во время ежегодной диспансеризации по полису дополнительного медицинского страхования. 

Если в разных лабораториях выдали бланки с разными единицами измерения, можно пересчитать одни единицы в другие на специальном калькуляторе. Например, в бланках с результатами анализа на билирубин одни лаборатории указывают мкмоль/л, а другие — мг/дл.

Чтобы результаты можно было сравнить, нужно привести их к единым единицам измерения — например, перевести оба в мкмоль/л. Сопоставление поможет понять, повысился или понизился уровень.

Правда, подобную информацию нельзя использовать в качестве руководства к действию — делать выводы должен врач.

По статистике, чем больше сдается анализов, тем выше вероятность, что хотя бы один результат отклонится от нормы. Если не попадание в ее границы беспокоит, лучше проконсультироваться с врачом. Правда, тест в этом случае скорее всего придется пересдать.

Важно запомнить

• Нормы в лабораториях различаются — это нормально;
• Разные лаборатории выдают разные результаты — это тоже нормально;
• Результаты анализов из разных лабораторий сравнивать тяжело. Чтобы получить надежные результаты, придется пересдать тест в лаборатории, в которой сдан первый анализ.

Ответ неверный: почему отличаются результаты тестов на антитела к SARS-CoV-2

Причиной ошибочных результатов тестов на антитела к SARS-CoV-2 может быть не только низкая чувствительность и специфичность систем, но и особенности конкретного организма и время сдачи анализа, рассказали опрошенные «Известиями» эксперты.

Например, есть вероятность получить неверные результаты, если набор антигенов в тесте не попадет в набор антител конкретного человека. Кроме того, система может ошибиться, приняв антитела к другому веществу за искомые, или, наоборот, не распознать антикоронавирусные.

Порой же организм вовсе не вырабатывает антитела к SARS-CoV-2, но у переболевшего появляется клеточный иммунитет, защищающий от COVID-19. Опрошенные «Известиями» специалисты дали советы, как снизить вероятность ошибки.

Добиться ответа

Есть несколько сложностей, сопутствующих тестированию на антитела, и они накладываются друг на друга, рассказали опрошенные «Известиями» эксперты. Во-первых, около 150 зарегистрированных в России тестов имеют различия.

Во-вторых, набор антител, вырабатывающийся при встрече с коронавирусом, индивидуален для каждого переболевшего.

Третья сложность заключается в том, что ученые не знают точный ответ на вопрос, какое время в организме переболевшего остаются антитела.

— Почти все из 150 зарегистрированных в России тестов основаны на детекции S-белка (части коронавируса. — «Известия»), — объяснил руководитель лаборатории геномной инженерии МФТИ Павел Волчков.

— Производителей этих белков в мире не так уж и много. Остальные компании их покупают и делают свои тест-системы. Всё зависит от того, насколько качественно сделаны системы: больше или меньше они кладут этого белка.

От этого зависит чувствительность теста.

Чувствительность и специфичность — основные характеристики систем, уточнил директор центра Genetico Артур Исаев.

— Первый показатель говорит о том, у какого количества переболевших пациентов система выявит антитела, — рассказал эксперт. — Если чувствительность теста низкая, он не выявит антитела, даже если они есть.

Как правило, значения этого параметра в разных системах колеблются в пределах 93–99%. Если у человека есть антитела, но при одном тестировании они «не нашлись», второе тестирование, скорее всего, выявит их.

Иногда анализ дает ложноположительные результаты. Это может случиться потому, что организм успел «познакомиться» и выработать антитела к веществу, похожему на фрагмент SARS-CoV-2. Система может ошибиться и принять такие антитела за антикоронавирусные. Также вероятно, что в использованном тесте набор антигенов не попадет в набор антител конкретного человека.

— В структуре вируса SARS-CoV-2 выделяется несколько антигенов — структур, против которых организм начинает вырабатывать антитела, — пояснил врач-инфекционист «Инвитро» Андрей Поздняков. — Самыми «сильными» в плане ответа иммунной системы человека являются два: нуклеокапсидный и спайковый.

Однако у части пациентов, перенесших подтвержденную коронавирусную инфекцию, обнаруживаются только IgG (класс антител. — «Известия») к спайковому антигену, у других пациентов — IgG к обоим антигенам (и спайковому, и нуклеокапсидному), а еще часть пациентов имеет IgG только к нуклеокапсидному антигену.

Почему так происходит, пока неясно.

Случаи, когда у переболевшего есть антитела только к участкам S-белка или только к частям N-белка, скорее исключения из правила. Обычно, если человек встретился с коронавирусом, у него появляются антитела к его разным участкам.

Тесту — время

Даже если человек перенес COVID-19, антитела к моменту тестирования могли уже исчезнуть. Поэтому существует примерный промежуток времени, когда рекомендуют сдавать анализ. Впрочем, даже его соблюдение полностью не гарантирует правильного результата. Слишком индивидуальна реакция организма на COVID-19.

— Скорость выработки антител и скорость их распада у людей разная, и на это влияет много факторов. Клинически значимо то, что уровень антител превышает определенный показатель — это говорит о том, что гуморальный иммунный ответ есть, — пояснил специалист по лабораторной диагностике инфекционных заболеваний лаборатории «Гемотест» Дмитрий Гордеев.

При подозрении на COVID-19 нужно сдавать тест на антитела IgM к SARS-CoV-2, считают в «Инвитро». Это «молодые» антитела, которые иммунная система начинает вырабатывать в ответ на инфекцию. Причем неважно, в какой клинической форме проявляется болезнь и проявляется ли вообще. С предполагаемого момента заражения должно пройти не более двух недель.

Однако некоторые специалисты уверены, что этот анализ непоказателен.

— Тесты на антитела IgM часто дают ложноположительные результаты, — отметил Артур Исаев. — Сами антитела класса М не очень «специфичные» и обладают меньшим сродством к антигенам вируса, чем класс G. Поэтому тест может среагировать на иные антитела класса M, не имеющие отношения к SARS-Cov-2. Клинического значения этот тест не имеет: слишком высока вариация интерпретации результатов.

Если от предполагаемого момента заболевания прошло больше трех недель, лучше сдавать и IgM, и IgG. Последние антитела представляют собой «архив», где организм хранит информацию о перенесенной инфекции.

Но особенность COVID-19 такова, что иногда оба типа антител обнаруживаются уже спустя три-четыре дня после появления первых симптомов или же, наоборот, выработка антител идет медленно.

Бывает, что их нет вовсе.

Если от момента предполагаемой инфекции прошло больше трех месяцев, рекомендуют сдавать анализ только IgG. Тот же тест советуют, если человек не болел вообще, а просто хочет проверить возможный факт «встречи» с SARS-CoV-2 в виде стертой или бессимптомной форм.

Титр антител не слишком показателен, отметили эксперты. Лучше не пробовать делать по нему какие-либо выводы, а ориентироваться только на качественный результат теста: то есть ответ «да» или «нет».

Антитело не для тела

Не все антитела к SARS-CoV-2 могут нейтрализовать вирус, также обратили внимание специалисты.

— Например, нуклеокапсидные защитить не способны. Они направлены против внутренней структуры вируса и не могут помешать его проникновению в клетку, — сообщил Артур Исаев. — Зато антитела к участку S-белка, так называемому RBD-антигену, как раз защищают от вторжения SARS-CoV-2. Впрочем, не стоит забывать о Т-клеточном иммунитете — он тоже защищает организм.

Уничтожение вируса в организмах некоторых людей происходит за счет не антител, а другой части иммунной системы — Т-лимфоцитов, или Т-клеток. У большинства инфицированных эти клетки способны распознавать фрагменты вируса.

Причем у людей, которые не болели COVID-19, тоже встречаются Т-клетки, которые реагируют на SARS-CoV-2. По мнению ученых, Т-клеточный ответ может наблюдаться из-за того, что активируются клетки иммунологической памяти на другие коронавирусы.

Но есть и другая версия: такие люди перенесли COVID-19 бессимптомно.

Теоретически если анализ на Т-клеточный иммунитет подтверждает его наличие, то с точки зрения иммунологии он должен защищать человека при следующей встрече с SARS-CoV-2. Однако стоит такой тест порядка 20 тыс. рублей. Нацеленные на IgG системы обойдутся на порядок дешевле — примерно 1–1,5 тыс. рублей в частной лаборатории и бесплатно, если сдать анализ в поликлинике по ОМС.

Специалист лаборатории объяснила, почему ПЦР-тесты на коронавирус могут выдавать ошибку › Статьи и новости › ДокторПитер.ру

Ранее в Роспотребнадзоре озвучивали правила, которые необходимо соблюдать пациентам перед тестированием. К примеру, за несколько часов до взятия мазка не рекомендуется есть и пить, пользоваться спреями для горла и носа, а также чистить зубы и красить губы.

Всё это, по словам специалистов, может повлиять на правильность результата.

Заведующая московской лабораторией молекулярной диагностики «Инвитро» Наталья Гасилова назвала «Доктору Питеру» еще несколько причин, которые могут приводить к выдаче ложных результатов ПЦР-теста.

— Прежде всего, надо определиться с понятиями, — говорит Наталья Гасилова. — Ложноположительный результат — это когда пациент не инфицирован коронавирусом, но лаборатория выдала положительный результат теста на SARS-CoV-2 методом ПЦР. Ложноотрицательный — когда человек на самом деле инфицирован, но лаборатория выдает «-».

Как получают ложноположительные результаты?

Основная причина — так называемая кросс-контаминация, перекрестное загрязнение одного образца содержимым другого. Это может произойти на любом этапе тестирования — взятии мазка, транспортировки или уже в лаборатории.

— Как правило, источником кросс-контаминации служат образцы с большим содержанием РНК вируса в пробе. Тогда для загрязнения достаточно попадания капель или даже аэрозоля с этого образца, — говорит Наталья Гасилова.

— Это может произойти в месте взятия мазка, при маркировке образца или пробирки, если медперсонал не меняет грязные перчатки. Есть также требование — оставлять зонд, которым берется биоматериал, в пробирке. Его полагается отламывать или отрезать ножницами.

При выполнении этой операции тоже есть риск испачкать перчатки, поэтому их надо каждый раз менять.

По словам специалиста, загрязнение «чистого» образца может случиться и при транспортировке анализов.

— Например, если крышка пробы не плотно закрыта, биоматериал может «подтекать». В итоге пробирка снаружи будет контаминирована и, если потом пробирки ставятся в один штатив и перчатки не меняются, частицы вируса могут «переноситься» в другой образец.

Еще такое бывает, когда в пробирке оставляются достаточно крупные зонды.

В этом случае крышка микропробирки закрывается с усилием, может периодически приоткрываться, а вытекающие капельки биоматериала опять же попадают на стенку пробирки снаружи, — поясняет медик.

В лаборатории, кроме регулярной смены перчаток, важно аккуратно открывать пробирки — так, чтобы микроаэрозоль из одной пробирки не попал в другую.

— У каждой лаборатории есть алгоритм борьбы с кросс-контаминацией, по каким признакам ее определить и что делать.

Самое сложное — контаминация продуктами амплификации или ампликонами (размножение фрагментов нуклеиновых кислот в исследовании ПЦР — Прим. ред.). По сути, это аварийная ситуация, которая требует проведения срочных мер в лаборатории.

В этом исследовании ее риск минимален, поскольку пробирка после амплификации не открывается, и ампликоны во внешнюю среду не попадают.

Возможные причины ложноотрицательных результатов

По словам Натальи Гасиловой, здесь основная причина кроется в чувствительности тест-системы, которая применяется в конкретной лаборатории.

— Сейчас большинство производителей выпускают наборы с чувствительностью 1000 копий РНК вируса на 1 миллилитр (1х10*3 ).

Она позволяет выявлять вирус как у бессимптомных и контактных в начале развития инфекции, так и в конце заболевания — уже на этапе выздоровления.

Но если в образце количество вируса будет меньше порога чувствительности, то лаборатория выдаст ложноотрицательный результат, — поясняет эксперт.

Еще на результат влияет корректность взятия биоматериала со слизистой оболочки носо- и ротоглотки: к примеру, мазок взяли только из зева, а надо еще и из носа. Повлияет на него также малая вирусная нагрузка в биоматериале — когда тест выполняется в самом начале болезни или, наоборот, практически при выздоровлении, когда вирус уже уходит из организма.